《临床医学检验》每日考点:IRMA和RIA的区别
2022年01月14日 来源:来学网
IRMA和RIA的区别有哪些?
IRMA与RIA同属放射性核素标记免疫测定技术,在方法学上各具典型性。因此从某种意义上,二者的比较代表了标记免疫分析中竞争和非竞争结合方法学特点的比较。
①标记物:RIA是以放射性核素标记抗原,抗原有不同种类,标记时需根据其理化和生物学特性,选用不同的放射性核素和方法;IRMA则是标记抗体,为大分子蛋白,性质较稳定,不同抗体标记方法基本相同,标记抗体的比活度高,提高了测定的灵敏度。
②反应速率:反应速率与反应物浓度成正比,IRMA反应中,标记抗体为过量,且抗原抗体结合为非竞争性,故反应速率比RIA快。
③反应原理:RIA为竞争抑制性结合,反应参数与待检抗原量成反比,IRMA为非竞争性结合,反应参数与待检抗原浓度呈正相关。
④特异性:IRMA采用针对不同抗原决定簇的双抗体结合抗原,反应不易受交叉反应物的干扰,测定特异性较高。
⑤灵敏度和检测范围:IRMA反应中,抗原与抗体属非竞争性,微量抗原能与抗体充分结合;RIA中标记抗原和待检抗原竞争,与有限量抗体的结合不充分,故IRMA测定的灵敏度明显高于RIA。此外,由于抗体量大,能结合较多的抗原量,IRMA用于抗原含量较高标本测定时,结果也较RIA好,IRMA标准曲线工作范围较RIA宽1~2个数量级。
⑥其他:RIA所用抗体为多克隆性,因此对其亲和力及特异性要求较高,但用量很少;IRMA为试剂过量的非竞争性结合反应,对抗体亲和力的要求不及RIA,但用量大。此外,RIA可以测定大分子和小分子抗原,但IRMA则只能测定至少有两个抗原决定簇的抗原。
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