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生物素标记蛋白质的注意事项包括：①根据抗原或抗体分子结构中所带可标记基团的种类以及分子的理化性质，选择相应的活化生物素和反应条件。②标记反应时，活化生物素与待标记抗原或抗体应有适当比例。③为了减少空间位阻影响可在生物素与被标记物之间加入交联臂样结构④生物素与抗原、抗体等蛋白质结合后不影响后者的免疫活性；标记酶时则结果有不同。