非特异性染色产生的原因：①一部分荧光素未与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去引起非特异性染色。②抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素尿蛋白，可与组织成分非特异性结合。③除去检查的抗原以外，组织中还可能存在类属抗原，可与组织中特异性抗原以外的相应抗体结合。④从组织中难于提纯抗原性物质，所以制备的免疫血清中往往混杂一些抗其他组织成分的抗体，以致容易混淆。⑤抗体分子上标记的荧光素分子太多，这种过量标记的抗体分子带过多的阴离子，可吸附于正常组织上而呈现非特异性染色。⑥荧光素不纯，标本固定不当等。