反应中，3-磷酸甘油醛的醛基氧化成羧基及羧基的磷酸化均由3-磷酸甘油醛脱氢酶催化，以NAD+为辅酶接受氢和电子生成NADH+H+。参加反应的还有无机磷酸，当3-磷酸甘油醛的醛基氧化脱氢成羧基，即与磷酸形成混合酸酐。故在酵解过程中催化产生NADH和消耗无机磷酸的酶是3-磷酸甘油醛脱氢酶。故本题选B。