青霉素皮试溶液的配制：1.80万青霉素加生理盐水溶解至4ml(20万U/ml)；2.取上液0.1ml+生理盐水至1ml(2万U/ml)；3.取上液0.1ml+生理盐水至1ml(2000U/ml)；4.取上液0.25ml+生理盐水至1ml(500U/ml)即配得青霉素皮试液。故青霉素皮试液的浓度是500U/ml。故答案为E。