维生素D缺乏性佝偻病的诊断主要根据病史、临床表现、血生化检查及骨骼X线表现综合诊断。血清25-（OH）D3（正常11～60ng/ml）和1，25-（OH）2D3（正常0.03～0.06μg/ml）水平在佝偻病初期就已明显降低，为可靠的早期诊断指标。当血清25-（OH）D3<8ng/ml时即可诊断为维生素D缺乏。