Tm值是指核酸分子内双链解开50%时的温度，在解链过程中，紫外吸光度的变化△A260达到最大变化值的一半时所对应的温度为解链温度。DNA的Tm值与其DNA长短以及碱基中的GC含量有关。DNA分子中GC含量越高，Tm值越高；DNA分子越长，Tm值越高；离子强度越高，Tm值越高。